Új koronavírus (SARS-CoV-2) multiplex valós idejű PCR készlet
Ez a rendkívül érzékeny, használatra kész PCR készlet liofilizált formában (fagyasztva szárítás) kapható a hosszú távú tároláshoz.A készlet szobahőmérsékleten szállítható és tárolható, és egy évig stabil.Minden cső a premixben tartalmazza a PCR-amplifikációhoz szükséges összes reagenst, beleértve a reverz transzkriptázt, a Taq polimerázt, a primereket, a próbákat és a dNTP-szubsztrátokat.Csak 13 ul desztillált vizet és 5 ul extrahált RNS templátot kell hozzáadni, majd futtatni és amplifikálni lehet a PCR készülékeken.
A qPCR gépnek meg kell felelnie a következő követelményeknek:
1. Illesszen rá 8 csíkos, 0,2 ml-es PCR-csövet
2. Négynél több észlelési csatornája van:
Csatorna | gerjesztés (nm) | Kibocsátás (nm) | Előkalibrált színezékek |
1. | 470 | 525 | FAM, SYBR Green I |
2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
3. | 571 | 621 | ROX, TEXAS-VÖRÖS |
4 | 630 | 670 | CY5 |
PCR-platformok:
7500 valós idejű PCR rendszer, Biorad CF96, iCycler iQ™ valós idejű PCR-érzékelő rendszer, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Az új koronavírus nukleinsav kimutatására szolgáló reagens hideglánc szállításának nehézségei
Ha a hagyományos nukleinsav-detektáló reagenseket nagy távolságra szállítják, a (-20±5) ℃ hideglánc tárolás és szállítás szükséges ahhoz, hogy a reagensekben lévő enzim bioaktivitása aktív maradjon.Ahhoz, hogy a hőmérséklet elérje a szabványt, több kilogramm szárazjégre van szükség minden 50 g-nál kevesebb nukleinsav-vizsgáló reagenshez, de ez csak két-három napig tarthat.Az ipari gyakorlat szempontjából a gyártók által kibocsátott reagensek tényleges tömege kevesebb, mint a tartály 10%-a (vagy jóval kevesebb, mint ez az érték).A tömeg nagy része szárazjégből, jégcsomagokból és habos dobozokból származik, így a szállítási költség rendkívül magas.
2020 márciusában a COVID-19 nagy léptékű kitörésnek indult külföldön, és drámaian megnőtt az új koronavírus nukleinsav kimutatására szolgáló reagens iránti kereslet.A hidegláncban lévő reagensek magas exportköltsége ellenére a gyártók többsége a nagy mennyiség és a magas haszon miatt ezt továbbra is elfogadja.
A pandémia elleni termékekre vonatkozó nemzeti exportpolitikák javításával, valamint az emberáramlás és a logisztika feletti nemzeti ellenőrzés korszerűsítésével azonban meghosszabbodik és bizonytalan a reagensek szállítási ideje, ami jelentős termékproblémákat eredményezett. a szállítás által.A meghosszabbított szállítási idő (nagyon gyakori a körülbelül fél hónapos szállítási idő) gyakori termékmeghibásodásokhoz vezet, amikor a termék eljut a megrendelőhöz.Ez a legtöbb nukleinsav-reagenst exportáló vállalkozást zavart.
A PCR reagens liofilizált technológiája segítette az új koronavírus nukleinsav kimutatására szolgáló reagens szállítását világszerte
A liofilizált PCR reagensek szobahőmérsékleten szállíthatók és tárolhatók, ami nemcsak a szállítási költséget csökkenti, hanem a szállítási folyamatból adódó minőségi problémákat is elkerülheti.Ezért a reagens liofilizálása a legjobb módja az exportszállítás problémájának megoldására.
A liofilizálás során az oldatot szilárd állapotba fagyasztják, majd vákuum alatt szublimálják és elválasztják a vízgőzt.A szárított oldott anyag ugyanolyan összetételű és aktivitású marad a tartályban.A hagyományos folyékony reagensekhez képest a Liming Bio által gyártott, teljes komponensű, liofilizált Novel Coronavirus nukleinsav-detektáló reagens a következő tulajdonságokkal rendelkezik:
Rendkívül erős hőstabilitás:56℃-on 60 napig állva kezelhető, a reagens morfológiája és teljesítménye változatlan marad.
Normál hőmérsékletű tárolás és szállítás:nincs szükség hűtőláncra, nem kell alacsony hőmérsékleten tárolni a feloldás előtt, teljesen engedje fel a hűtőteret.
Használatra kész:az összes komponens liofilizálása, nincs szükség rendszerkonfigurációra, elkerülve a nagy viszkozitású komponensek, például enzimek elvesztését.
Multiplex célpontok egy csőben:a kimutatási célpont az új koronavírus ORF1ab gén, N gén, S gén a vírus genovariáció elkerülése érdekében.A hamis negatívok számának csökkentése érdekében a humán RNáz P gént belső kontrollként használják, hogy kielégítsék a mintaminőség-ellenőrzés klinikai igényeit.